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分光光度计小知识

分光光度计的结构
紫外可见分光光度计的结构主要是由电源、光源、单色器、样品室、光电转换器、前置放大器、数据处理、外围设备等部分组成。
光 源:指的是发光的物体。理想的光源应能提供连续辐射,光的强度必须足够大,并且在整个光谱区内其强度不应随波长有明显变化。当然理想的光源是不存在的,没有那种光源能在所有波长点提供足够强大而且稳定的光辐射。所以根据不同的波长,要采用不同的光源。
钨灯:320-1100nm(可见区)
氘灯:190- 400nm(紫外区)
单 色器:是一种用来把来自光源的混合光分解为单色光并能随意改变波长的装置。它主要有入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成,其中色散元件是最关键的,因为它的质量决定了单色器质量的优劣。
试 样室:用来搁放测试样品的一个暗盒装置。
光电转换器:把微弱的光信号转变成微弱的电信号。能检测通过测试溶液与参比溶液的光强度,并以电信号显示出来,用于体现测试溶液与参比溶液的光强度比值。通常紫外可见分光光度计使用的检测器有硅光电池、光电管和光电倍增管,今天由于半导体技术的迅速发展,光电池的性能越来越好,且光电倍增管的价格越来越低,所以光电管逐渐被淘汰了。
前置放大器:一般由高阻抗集成运算放大器组成,完成微电流(电压)的放大。
直流稳压电源:组成不同电压(电流)的直流工作电源,满足仪器各个负载需求。

显 示器:LED、LCD电压表组成。


分光光度计的基本原理
分光光度计的理论依据是建立在光的吸收定律上的。光的吸收定律又称:朗伯-比尔定律。
就是利用物质在光的照射激发下,具有选择性吸收现象来对物质进行定性和定量分析。
I0:入射的单色光强度
T =I/I0×100% I:出射的单色光强度
T:透射比强度(透光率),用百分数表示。


朗伯-比耳定律:A=KCL A=log1/T = -log T
A:吸光度(吸收比强度)
K:吸光系数
C:样品的浓度(g/l)
L:比色皿的宽度(cm)


吸光度:当一束平行的单色光,垂直照射在均匀的被测样品时,该样品就有一定的吸收,样品对入射光减弱吸收的程度,称为吸光度,通过仪器便可测出,吸光度是没单位的一个量。从以上公式中可以看出,当入射光强度一定时,物质的吸光度与物质中吸光物质的浓度和物质厚度的乘积成正比。



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